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GT100南芥或水稻穗RNA快速提取步骤

【 发布时间:2016-03-30 】

一种,湿磨法

1.取打碎机适配器于-80°冷冻约15min

2.取一指节长度的花序,最好带上一片叶子,(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入国产2ml EP管中,加一粒钢珠,液氮速冻。之后用镊子取出,快速加入适配器中。(最好用国产的EP管即可,进口的管子液氮冻过后,容易裂)

3.打碎15s50HZ。(水稻嫩叶为。45S60HZ 老叶为,70S 60HZ

4.将材料再次放入液氮中。

5.用磁铁吸出钢珠,加入1ml Trizol,余下步骤即正常的RNA提取步骤。

第二种,干磨法

1.取一指节长度的花序(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入国产2ml EP管中,加一粒钢珠,400ul Trizol

2.打碎1min 50HZ (水稻嫩叶为。45S60HZ 老叶为,70S 60HZ 

3.吸出钢珠,补600ul Trizol

4.余下步骤即正常的RNA提取步骤。

注意:钢珠遇到Trizol 会被溶解一部分,所以之后的提取液是黄色的(有铁离子),不必在意,之后异丙醇那一步铁离子会和上清一起别弃掉。

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